HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應用到生物化學(xué)、食品分析、醫藥研究、環(huán)境分析、無(wú)機分析等各種領(lǐng)域。
液相色譜在使用過(guò)程中的四大關(guān)鍵因素
01、液相色譜儀本身：
對于儀器本身一般不會(huì )有問(wèn)題，特別是剛買(mǎi)回來(lái)的新儀器。對于儀器本身最重要的就是儀器的校驗，剛買(mǎi)回來(lái)的儀器一般都是由賣(mài)家先對儀器做系統的確認工作(包括IQ、PQ、OQ)，確認順利通過(guò)后，再請國家或省級儀器檢定局的來(lái)校驗，檢定合格后就可以放心用了，除此之外，一些做得好的公司每半年會(huì )對儀器進(jìn)行一次的內部校驗，目的就是為了保證儀器的正?？蛇\行狀態(tài)。
02、色譜條件：
色譜條件一般包括流動(dòng)相、色譜柱、檢測波長(cháng)、流速及進(jìn)樣量。流動(dòng)相就涉及到配制流動(dòng)相所用到的水和試劑試液，水一般要求用超純水或其他水的電阻率不大于18.2兆歐級別，試劑試液要求用色譜級別的，原因為防止水和試劑試液中的雜質(zhì)對色譜結果的干擾。
色譜柱會(huì )因不同的品種而有不同的要求，但每根色譜柱都有它的清洗要求，這個(gè)在色譜柱說(shuō)明書(shū)上都可以找到，一定要根據上面的要求進(jìn)行，否則會(huì )造成色譜柱效下降和色譜柱的使用壽命縮短，檢測波長(cháng)也會(huì )因品種的不同有不同的要求，這里需要指出的是要注意觀(guān)察檢測器氘燈能量的變化，比如基線(xiàn)波動(dòng)大，活性成分的響應值突然變小等，都有可能是氘燈的能量不足所引起的，氘燈一般建議使用800小時(shí)，但實(shí)際上使用時(shí)間不止，可根據實(shí)際情況更換。
流速也因品種的不同而不同，一般為1.0ml/min，流速是不可隨意改動(dòng)的，特別是作為QC人員，但是作為研發(fā)人員，有時(shí)為了摸索條件或進(jìn)行方法耐用性驗證，會(huì )對流速進(jìn)行改變以評價(jià)方法的適用性。對于進(jìn)樣量因不同的品種也有不同規定，進(jìn)樣量這塊現在都使用自動(dòng)進(jìn)樣，所以進(jìn)樣精密度都很好，不需強調什么
03、操作人員：
首先，作為液相操作人員，一定要認真學(xué)習液相的說(shuō)明書(shū)，掌握液相硬件和軟件的操作，掌握日常的維護保養，掌握最基礎故障的排除和維修。一般液相的操作規程也是有操作人員起草的，所以只要嚴格按照操作要求進(jìn)行操作，一般不會(huì )出現問(wèn)題，當然這里需要特別指出的是對于液相的日常維護保養很重要，比如流動(dòng)相的過(guò)濾、脫氣、泵密封墊的清洗、系統管路的清洗、溶劑過(guò)濾頭的清洗等，倘若不堅持，很容易導致色譜柱堵塞、系統壓力過(guò)大、色譜峰異常等不必要的故障，浪費時(shí)間。其次，操作人員在配制液相分析用樣品溶液時(shí)，最好由同一個(gè)人單獨完成，以免不必要的偶然誤差。
04、液相安裝環(huán)境：
液相色譜儀應盡量安裝于水平、遠離振動(dòng)、電磁干擾的屋內的臺面上，有條件的話(huà)盡量將液相數據處理系統分隔開(kāi)，一個(gè)是防止色譜基線(xiàn)噪音偏大，基線(xiàn)不穩等，一個(gè)是為減少對人體的危害。
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