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色譜法是一種非自發(fā)、需耗能(由高壓氣體或液體提供)的分離方法。被檢樣品混合物中的不同組分與互不相溶的流動(dòng)相( mobile phase)和固定相( stationary phase)之間的吸附、溶解、分配或離子交換等相互作用是存在著(zhù)差異的,當流動(dòng)相攜帶著(zhù)多組分混合物流過(guò)固定相時(shí),使得性質(zhì)不同的各個(gè)組分隨流動(dòng)相移動(dòng)的速度產(chǎn)生了差異,隨著(zhù)組分在兩相之間持續發(fā)生反復多次的作用,原來(lái)微小的差異累加產(chǎn)生了很大的效果,從而使各組分在柱內移動(dòng)的同時(shí)逐漸分離。
例如某含A、B兩個(gè)組分的試樣,已知A組分在固定相中的分配系數(即與固定相的作用力)大于B,當樣品由流動(dòng)相攜帶進(jìn)入填充有固定相的色譜柱頭時(shí)(如圖1-3所示),組分A、B是*相混的。由于A(yíng)組分在固定相中的溶解能力比B大,故A組分的移動(dòng)速度慢,經(jīng)過(guò)多次反復分配后,分配系數較小的B組分首先被帶出色譜柱,而分配系數較大的組分A則遲被帶出色譜柱,從而實(shí)現了分離。
在經(jīng)典色譜分離中,從色譜柱后流出的各組分用容器一一收集后,供進(jìn)一步的分析或使用。而在現代色譜儀器分析中,從色譜柱流出的被分離了的組分被流動(dòng)相“在線(xiàn)”導入檢測器,將各組分的濃度變化用電壓、電流信號記錄下來(lái),直接對每個(gè)組分進(jìn)行定性和定量分析。
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